DVDやゲームソフトの売却に伴う利益について確定申告が必要かどうか？

個人の不用品を売った場合は課税の対象外です。つまり税金などの心配は全くいらないということです。但し、貴金属や宝石、書画、骨董品などで、1個（又は1組）の価格が30万円を超える場合は課税対象となります。

不用品と営利目的の混合収入があり
その区別は、私にしか分かりません。継続的に販売行うことで、全てが営利目的だと判断されないか心配です。

不用品のDVDやゲームは全て数量1つで
営利目的の方は同一商品の数量が2以上です。その区別で判断できるのかなとは思うのですが
不用品は店頭で購入したのでレシートはありません。

不用品の分の利益は合計で40万ぐらいになります。
不用品の売却で1個又は1組の価格が30万未満であれば合計金額が何百万でも問題ないのでしょうか？

不用品と営利目的品は区別しておく必要があります。営利目的は、物品に利益を乗せて継続的(ほぼ年間を通して)に販売する場合になります。なお、不用品の売却の場合、1個30万円以下であれば合計がいくらでも問題はないです。